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Pureza del péptido frente a contenido neto de péptido

La pureza por HPLC y el contenido neto de péptido miden cosas distintas. Vea por qué un polvo puede mostrar un 99% de pureza y contener menos de un 99% de péptido en peso.

Dos porcentajes, dos preguntas

La pureza describe qué parte del material relacionado con el péptido detectado es el péptido buscado. El contenido neto de péptido describe qué parte del peso total del polvo es péptido. Un péptido liofilizado no es péptido puro en peso: junto a las cadenas peptídicas contiene contraiones unidos a grupos cargados y algo de agua residual. El cálculo de pureza por HPLC no ve estos componentes, pero también pesan.

Pureza, contenido neto de péptido y cantidad nominal comparados
CifraQué describeFuente habitual
Pureza por HPLCLa fracción del área de picos detectada que corresponde al péptido buscado.HPLC de fase inversa con detección UV
Contenido neto de péptidoLa fracción del peso total del polvo que es péptido, sin contraiones ni agua.Análisis de aminoácidos o análisis (elemental) de nitrógeno
Cantidad nominalLa cantidad indicada en la especificación del producto, como 10 mg.La especificación del producto, no un resultado de análisis
Peso impreso en un informeUna cantidad que el emisor informa para la muestra analizada.El método del emisor, que el informe debería indicar

Qué más contiene un polvo de péptido

Los péptidos sintéticos suelen purificarse por HPLC de fase inversa con fases móviles ácidas y se aíslan como sales. Los grupos básicos, el extremo N libre y cadenas laterales como las de lisina, arginina e histidina, llevan contraiones: habitualmente trifluoroacetato (TFA) o, tras un intercambio de sal, acetato o cloruro. Cuantos más grupos básicos tenga una secuencia, más peso de contraión puede llevar. Los polvos liofilizados también retienen agua, y la cantidad puede cambiar con la manipulación y la humedad del aire.

Por eso el contenido neto de péptido suele quedar claramente por debajo del 100%, incluso con una pureza alta. Las dos cifras son independientes: una muestra puede mostrar un 99% de pureza y contener aun así una parte considerable de contraiones y agua en peso.

Por qué importa la diferencia en el laboratorio

Un cálculo que dependa de la cantidad de péptido realmente presente, como preparar una solución de referencia de concentración conocida para una comparación analítica, necesita el contenido neto de péptido. Multiplicar la cantidad nominal por el porcentaje de pureza no da la cantidad de péptido, porque la pureza no dice nada de contraiones ni de agua. Si un documento solo indica la pureza, el contenido neto de péptido es desconocido, no del 100%. Conserve en su registro:

  • La forma de sal, si el documento la indica (por ejemplo, sal de acetato o de TFA).
  • Si se midió el contenido neto de péptido y con qué método.
  • La cantidad nominal, la pureza y cualquier peso medido, cada uno en su propio campo.
  • Ninguna cifra derivada de otra, como la pureza multiplicada por la cantidad nominal.

Lea el informe BC10 con esta distinción

El informe de BPC 157 10 mg BC10-20260908S6179 (lote 5828704) imprime tres resultados: Purity (LCMS/HPLC) 99.87% frente a una especificación de ≥ 99.0%, Mass Spectrum «Detected» y Peptides Weight 11.39 mg sin especificación. El informe no indica contenido neto de péptido ni forma de sal, y no dice cómo se determinó el peso ni si se refiere solo al péptido. Conserve los 11.39 mg tal como están impresos, separados de los 10 mg de la etiqueta, y pregunte cómo se obtuvo la cifra antes de usarla en un cálculo.

El emisor (TJQXGD) declara que los datos proceden de un laboratorio asociado externo, que ni él ni el laboratorio tienen acreditación CMA/CNAS y que este documento no tiene validez de certificación legal.

Los resultados se han transcrito de este informe de muestra. Prevalece el documento original; estos resultados no son especificaciones ni garantías para otras muestras.

Solicite las cifras que necesita su trabajo

Un informe de análisis estándar puede no incluir el contenido neto de péptido ni la forma de sal. Si su trabajo depende de alguno de ellos, nómbrelo en su solicitud de documentos y pregunte si está disponible para el lote cotizado. Si no lo está, regístrelo como desconocido en lugar de estimarlo.

Solicite los documentos del lote exacto de su cotización. Un informe solo describe el lote analizado, así que compruebe que su número de lote coincide con el lote que recibe.

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