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肽纯度与净肽含量的区别

HPLC 纯度和净肽含量测量的是不同的东西。了解为什么一份粉末的纯度可以是 99%,而按重量计肽的比例却低于 99%。

两个百分比,两个问题

纯度说明检测到的肽类相关物质中有多大比例是目标肽;净肽含量说明粉末总重量中究竟有多大比例是肽。冻干肽按重量计并不全是肽:除肽链外,它还含有结合在带电基团上的反离子和一些残留水分。HPLC 纯度计算看不到这些成分,但它们同样有重量。

纯度、净肽含量与标示量对比
数值说明什么常见来源
HPLC 纯度检测到的峰面积中属于目标肽的比例。反相 HPLC,紫外检测
净肽含量粉末总重量中肽所占的比例,不含反离子和水分。氨基酸分析或氮(元素)分析
标示量产品规格中写明的标称量,例如 10 mg。产品规格,而非检测结果
报告上印的重量出具方为所检样品报告的一个量。出具方的方法,报告应当写明

肽粉末里还有什么

合成肽通常用酸性流动相的反相 HPLC 纯化,并以盐的形式分离得到。碱性基团(游离 N 端以及赖氨酸、精氨酸、组氨酸等侧链)带有反离子,常见的是三氟乙酸根(TFA),经过换盐后也可能是醋酸根或氯离子。序列中的碱性基团越多,可能携带的反离子重量就越大。冻干粉末还会保留水分,含量会随操作和空气湿度变化。

因此,即使纯度很高,净肽含量也常常明显低于 100%。这两个数值彼此独立:一个样品的纯度可以是 99%,按重量计却仍含有相当比例的反离子和水分。

这一区别在实验室中的意义

凡是取决于实际肽量的计算,例如为分析比对制备已知浓度的参比溶液,都需要用净肽含量。用标示量乘以纯度百分比得不到肽量,因为纯度完全不反映反离子和水分。如果文件只给出纯度,净肽含量就是未知的,而不是 100%。请在记录中保留:

  • 盐型(如文件写明,例如醋酸盐或 TFA 盐)。
  • 是否测定了净肽含量,以及用的是什么方法。
  • 标示量、纯度和任何实测重量,各占一栏。
  • 不要用一个数值推算另一个数值,例如用纯度乘以标示量。

用这一区别阅读 BC10 报告

BPC 157 10 mg 报告 BC10-20260908S6179(批号 5828704)印有三项结果:Purity (LCMS/HPLC) 99.87%,指标要求 ≥ 99.0%;Mass Spectrum 为“Detected”;Peptides Weight 11.39 mg,未列指标要求。报告既没有写净肽含量,也没有写盐型,也没有说明这个重量是如何测定的、是否只指肽。请按原样记录 11.39 mg,与 10 mg 标示量分开,在把它用于任何计算之前先问清该数值的来源。

出具方(TJQXGD)声明:检测数据由第三方合作实验室提供,出具方及合作实验室均不持有 CMA/CNAS 认证资质,本文件不具有法定证明效力。

结果转录自本样本报告,以原始文件为准;这些结果不构成其他样本的规格或保证。

索取您的工作需要的数值

标准检测报告不一定包含净肽含量或盐型。如果您的工作取决于其中任何一项,请在文件请求中写明,并询问报价批次是否能提供。如果不能,请记为未知,不要估算。

请在询价时索取报价所对应批次的文件。一份报告只说明它检测的那一批,请核对报告上的批号与您收到的批号是否一致。

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