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Estas ferramentas calculam quantidades para o planejamento no laboratório. Não escolhem solvente, não verificam solubilidade e não comprovam a qualidade da amostra. Somente para pesquisa laboratorial. Não indicado para uso em humanos ou animais.
Da massa do peptídeo à concentração molar
A concentração molar expressa a quantidade de substância em mols por volume de solução. Uma concentração mássica, como mg/mL, responde a outra pergunta: quanta massa há nesse volume. Para converter uma na outra é preciso a massa molar da entidade química que está sendo contada.
Use c = m ÷ (M × V), em que c é a concentração em mol/L, m a massa em gramas, M a massa molar em g/mol e V o volume final da solução em litros. Um mol/L é um molar, escrito 1 M. Milimolar, micromolar e nanomolar correspondem a 10⁻³, 10⁻⁶ e 10⁻⁹ mol/L.
A primeira ferramenta converte as unidades de massa e de volume informadas antes de aplicar a equação. O campo opcional de teor de peptídeo é uma correção por fração mássica fornecida por você; não é uma estimativa obtida da sequência nem do nome do produto. Deixe em 100 se quiser um cálculo nominal sem correção ou se a massa informada já for massa líquida de peptídeo.
Exemplo resolvido: 2 mg em um volume final de 4 mL
Considere uma entidade peptídica com massa molar de 1000 g/mol. Se houver 2 mg dessa entidade em um volume final de 4 mL, a concentração mássica é 0,5 mg/mL. Converta 2 mg em 0,002 g e 4 mL em 0,004 L antes de calcular a quantidade e a concentração.
A quantidade é 0,002 g ÷ 1000 g/mol = 0,000002 mol, ou 2 µmol. Dividindo por 0,004 L, obtém-se 0,0005 mol/L = 0,5 mM = 500 µM. A mesma conta vale se você informar 2 mg e 4 mL ou 2000 µg e 4000 µL.
| Grandeza | Valores equivalentes |
|---|---|
| Massa | 2 mg = 2000 µg = 0,002 g |
| Volume final | 4 mL = 4000 µL = 0,004 L |
| Quantidade | 2 µmol |
| Concentração mássica | 0,5 mg/mL = 0,5 g/L |
| Concentração molar | 500 µM = 0,5 mM = 0,0005 M |
Atalho para converter mg/mL em µM
Quando a massa molar está em g/mol, µM = mg/mL × 1.000.000 ÷ massa molar. Para mM, use mg/mL × 1000 ÷ massa molar. O atalho funciona porque 1 mg/mL equivale numericamente a 1 g/L; os demais fatores convertem mol/L na unidade molar escolhida.
Por exemplo, 0,25 mg/mL de uma entidade peptídica de 2000 g/mol correspondem a 125 µM. Outro peptídeo com os mesmos 0,25 mg/mL pode ter outra concentração molar se a sua massa molar for diferente. A concentração mássica sozinha não diz quantas moléculas estão presentes.
Antes de comparar dois experimentos, verifique se as duas concentrações usam a mesma entidade peptídica e a mesma base de massa. Um valor obtido da massa bruta do pó não é automaticamente comparável a outro corrigido com um teor de peptídeo medido.
Massa bruta, teor de peptídeo e pureza
Uma preparação pesada pode conter peptídeo, contraíons, água residual e outros componentes. Se uma documentação adequada estabelecer uma fração mássica de peptídeo, multiplique a massa bruta por essa fração antes de converter em mols a massa de peptídeo resultante. A massa molar deve corresponder à entidade representada por essa massa corrigida.
No exemplo de 2 mg, uma fração mássica de peptídeo de 80 % documentada de forma explícita daria 1,6 mg na base peptídeo e 400 µM no mesmo volume final de 4 mL, usando 1000 g/mol. É um exemplo aritmético, não um valor de ensaio de um produto da NorthVerity.
Uma porcentagem de área de HPLC não é automaticamente uma fração mássica. O conteúdo líquido de peptídeo e a pureza cromatográfica descrevem aspectos diferentes de um material, e o uso deles no cálculo da concentração do peptídeo-alvo depende do método analítico e da base de expressão. Esta ferramenta não multiplica por uma porcentagem de HPLC nem deduz a pureza do peptídeo-alvo.
Diluir uma solução-estoque conhecida: C₁V₁ = C₂V₂
Em uma diluição que conserva a quantidade de soluto, C₁V₁ = C₂V₂. C₁ é a concentração da solução-estoque, V₁ o volume de solução-estoque transferido, C₂ a concentração desejada e V₂ o volume final da solução. Isolando a transferência, obtém-se V₁ = C₂V₂ ÷ C₁.
Suponha que você precise de 10 mL a 100 µM a partir de uma solução-estoque de 10 mM. Primeiro, expresse as duas concentrações na mesma unidade: 10 mM são 10.000 µM. O volume de transferência é 100 × 10 ÷ 10.000 = 0,1 mL, ou 100 µL. Transfira esse volume e complete a solução até um volume final total de 10 mL.
Se os volumes forem considerados aditivos, o diluente estimado é de 9,9 mL. A calculadora mostra a transferência e o volume final necessário porque o volume final é a grandeza de referência. A equação não determina um solvente compatível nem garante que o peptídeo continue dissolvido.
| Dado ou resultado | Valor |
|---|---|
| Concentração da solução-estoque | 10 mM |
| Concentração desejada | 100 µM |
| Volume final da solução | 10 mL |
| Volume de solução-estoque a transferir | 100 µL |
| Diluente estimado com volumes aditivos | 9900 µL |
Verificações antes de confiar no número
Use o volume final da solução em vez de supor que o solvente adicionado é igual ao volume da solução pronta. Mantenha as conversões de unidades visíveis no registro. Confundir mg com µg, ou mM com µM, muda o resultado por um fator de mil.
Uma concentração desejada maior que a da solução-estoque não pode ser obtida só com diluição. Se as duas concentrações forem iguais, não é preciso diluir. Se a transferência calculada ficar abaixo da faixa de trabalho validada do seu equipamento, o número exibido não é uma instrução prática de pipetagem; planeje uma diluição intermediária adequada conforme o seu método de laboratório.
O cálculo supõe que o material representado pela massa informada está presente na solução na base indicada. Dissolução incompleta, adsorção, precipitação, degradação e perdas na transferência são questões experimentais à parte. Uma concentração calculada não é uma medição analítica da solução final.
Registre o identificador do material, o lote, a forma química, a base de massa, a fonte da massa molar, o volume final, os cálculos e a data de preparo. Em questões de compra, peça os documentos do lote oferecido e resolva as informações que faltam antes de tratar um valor nominal como verificado.
O que é COA? Como ler o certificado de análise de um peptídeo
Perguntas frequentes
Posso converter mg/mL em µM sem o peso molecular? Não. A concentração molar conta a quantidade em mols, então a massa molar correspondente é necessária. Já uma concentração mássica pode ser informada sem ela.
1 mg/mL é igual a 1 µg/µL? Sim. O numerador e o denominador mudam pelo mesmo fator de 1000, e a concentração mássica é a mesma.
Esta calculadora escolhe um solvente ou uma condição de armazenamento? Não. Use a documentação específica do material e um método de laboratório adequado. O cálculo fornece quantidades, não evidências de solubilidade, estabilidade ou adequação biológica.
Diluição seriada: fórmula, tabela e exemplos resolvidos
Uma diluição seriada usa a solução de uma diluição para preparar a seguinte. Nesta planilha, todas as etapas usam o mesmo fator de diluição e o mesmo volume preparado. A solução-estoque original é o ponto de partida, não o tubo 1. Por isso, a primeira concentração diluída é C₀/D e a concentração na etapa n é C₀/Dⁿ.
Aqui, D é um fator de redução maior que 1. Uma diluição 1:10 significa uma parte da solução anterior em dez partes no total: uma parte de amostra mais nove de diluente quando os volumes são aditivos. Não significa uma parte de amostra mais dez de diluente. Outras referências chamam de diluição a fração restante, 1/D; registre a convenção junto com os seus números.
Se V é o volume preparado em cada tubo, o volume de transferência é V/D e o diluente estimado é V − V/D. Informe a concentração inicial em M, mM, µM ou nM; a tabela mantém essa unidade de concentração do começo ao fim. Todos os volumes exportados são expressos em µL, mesmo que a entrada use mL ou L.
A terceira calculadora aplica essas equações de 1 a 48 etapas. Os volumes descrevem um modelo de planejamento com volumes aditivos, mistura homogênea e nenhuma perda de soluto na transferência. Um método diferente, fatores variáveis por etapa ou amostragens adicionais exigem um plano à parte.
Quatro etapas 1:10 a partir de uma solução-estoque de 1000 µM
Escolha uma solução inicial de 1000 µM, um fator de 10, quatro etapas de diluição e um volume preparado de 1000 µL por tubo. Cada etapa recebe 100 µL da origem indicada e cerca de 900 µL de um diluente compatível. As concentrações sucessivas são 100, 10, 1 e 0,1 µM.
Somente os primeiros 100 µL vêm da solução-estoque original. A segunda transferência sai do tubo 1, a terceira do tubo 2 e a quarta do tubo 3. O diluente total estimado é de 4 × 900 = 3600 µL. Essas quantidades não incluem material extra para volume morto, perdas ou repetições.
Após a transferência seguinte, os tubos 1 a 3 ficam com 900 µL cada. O tubo 4 fica com 1000 µL porque este plano não prevê transferência a partir do último tubo. Retirar uma alíquota representativa de um tubo bem misturado reduz o volume, mas não muda a concentração. Se você precisar de pelo menos 1000 µL em cada tubo, um volume preparado de 1000 µL não basta para os primeiros tubos.
| Etapa / origem | Concentração (µM) | Transferência | Diluente estimado | Resto após a transferência |
|---|---|---|---|---|
| 1 / solução-estoque | 100 | 100 | 900 | 900 |
| 2 / tubo 1 | 10 | 100 | 900 | 900 |
| 3 / tubo 2 | 1 | 100 | 900 | 900 |
| 4 / tubo 3 | 0,1 | 100 | 900 | 1000 |
Série 1:2 e planejamento do volume restante
Com uma solução inicial de 20 µM, um fator de 2 e 200 µL preparados por tubo, cada etapa junta 100 µL da solução anterior com cerca de 100 µL de diluente. Quatro etapas resultam em 10, 5, 2,5 e 1,25 µM. Os três primeiros tubos ficam com 100 µL após a transferência seguinte; o último fica com 200 µL.
Neste modelo de volume constante, o que resta em um tubo anterior é R = V × (1 − 1/D). Para manter pelo menos R nesses tubos, use V = R × D/(D − 1) e depois confira a capacidade do recipiente e a faixa de transferência. Por exemplo, manter 200 µL em cada tubo anterior de uma série 1:2 exige 400 µL preparados por tubo e uma transferência de 200 µL. O último tubo conteria 400 µL, a menos que o seu método preveja uma retirada.
Uma série 1:2 e uma série 1:10 cobrem espaçamentos de concentração diferentes. Escolha o fator de acordo com o método experimental e a faixa necessária. A calculadora não escolhe concentração de ensaio, exposição biológica nem dose de tratamento.
Copie a tabela de diluição e confira a planilha
“Copiar tabela” gera uma planilha separada por tabulações para uso em planilhas eletrônicas. “Baixar CSV” inclui a concentração inicial, o fator por etapa, o tubo de origem, o volume preparado, a transferência, o diluente estimado e o volume restante após a transferência seguinte. Se o acesso à área de transferência não estiver disponível, a ferramenta mostra um texto selecionável como alternativa. Mudar os dados apaga o resultado anterior, para que uma tabela exportada corresponda ao cálculo exibido.
Confira a menor concentração, o volume transferido, a solução-estoque disponível e o líquido que resta em cada tubo. Uma transferência calculada abaixo de 1 µL é sinalizada para conferência com a faixa validada do equipamento; um número maior não é automaticamente adequado para qualquer pipeta. Misture conforme o método de laboratório antes de retirar a próxima alíquota e considere separadamente as perdas na transferência.
O CSV é um registro de cálculo, não uma medição nem um protocolo de laboratório completo. Mantenha no registro associado a identidade do material, o lote, o solvente, a data de preparo e qualquer ajuste experimental. Solubilidade, adsorção, estabilidade e desempenho dos instrumentos não são deduzidos do fator de diluição.
Ligue o cálculo à documentação do material
Na compra de peptídeos, defina primeiro o que a concentração de partida representa: a forma química indicada, a base de massa e a massa molar correspondente. A calculadora de peso molecular ajuda com uma sequência aceita, e o guia de pureza e conteúdo líquido explica por que uma porcentagem de área de HPLC não é automaticamente uma correção da massa pesada.
Revise as informações disponíveis sobre o material e peça a documentação do lote oferecido ao solicitar uma cotação por escrito. Informe o identificador do material e as informações que precisam ser esclarecidas. O cálculo em si não verifica o material fornecido, a disponibilidade atual nem o lote oferecido.
Calculadora de massa molar e peso molecular de peptídeos
Pureza do peptídeo x conteúdo líquido de peptídeo
O que é COA? Como ler o certificado de análise de um peptídeo
Equações e referências
Somente pesquisa laboratorial. Não destinado ao uso humano ou animal.