Calculadora de molaridad: diluciones y dilución seriada

De la masa del péptido a la concentración molar

La concentración molar expresa la cantidad de sustancia en moles por volumen de solución. Una concentración másica, como mg/mL, responde a otra pregunta: cuánta masa hay en ese volumen. Para pasar de una a otra se necesita la masa molar de la entidad química que se cuenta.

Use c = m ÷ (M × V), donde c es la concentración en mol/L, m la masa en gramos, M la masa molar en g/mol y V el volumen final de la solución en litros. Un mol/L es un molar, que se escribe 1 M. Milimolar, micromolar y nanomolar corresponden a 10⁻³, 10⁻⁶ y 10⁻⁹ mol/L.

La primera herramienta convierte las unidades de masa y volumen introducidas antes de aplicar la ecuación. Su campo opcional de contenido de péptido es una corrección por fracción másica que usted aporta; no es una estimación obtenida de la secuencia ni del nombre del producto. Déjelo en 100 si quiere un cálculo nominal sin corregir o si la masa introducida ya es masa neta de péptido.

Usar la calculadora de masa a molaridad

Ejemplo resuelto: 2 mg en un volumen final de 4 mL

Tome como ejemplo una entidad peptídica con una masa molar de 1000 g/mol. Si hay 2 mg de esa entidad en un volumen final de 4 mL, la concentración másica es 0,5 mg/mL. Convierta 2 mg en 0,002 g y 4 mL en 0,004 L antes de calcular la cantidad y la concentración.

La cantidad es 0,002 g ÷ 1000 g/mol = 0,000002 mol, es decir, 2 µmol. Al dividir entre 0,004 L se obtiene 0,0005 mol/L = 0,5 mM = 500 µM. El cálculo es el mismo si introduce 2 mg y 4 mL o 2000 µg y 4000 µL.

Atajo para convertir mg/mL en µM

Si la masa molar está en g/mol, µM = mg/mL × 1 000 000 ÷ masa molar. Para mM, use mg/mL × 1000 ÷ masa molar. El atajo funciona porque 1 mg/mL equivale numéricamente a 1 g/L; los demás factores convierten mol/L en la unidad molar elegida.

Por ejemplo, 0,25 mg/mL de una entidad peptídica de 2000 g/mol corresponde a 125 µM. Otro péptido con los mismos 0,25 mg/mL puede tener otra concentración molar si su masa molar es distinta. La concentración másica por sí sola no indica cuántas moléculas hay.

Antes de comparar dos experimentos, compruebe si ambas concentraciones usan la misma entidad peptídica y la misma base de masa. Un valor obtenido de la masa bruta del polvo no es automáticamente comparable con otro corregido con una fracción de contenido de péptido medida.

Masa bruta, contenido de péptido y pureza

Una preparación pesada puede contener péptido, contraiones, agua residual y otros componentes. Si una documentación adecuada establece una fracción másica de péptido, multiplique la masa bruta por esa fracción antes de convertir en moles la masa de péptido resultante. La masa molar debe corresponder a la entidad que representa esa masa corregida.

En el ejemplo de 2 mg, una fracción másica de péptido del 80 % documentada de forma explícita daría 1,6 mg en base péptido y 400 µM en el mismo volumen final de 4 mL, con 1000 g/mol. Es un ejemplo aritmético, no un valor de ensayo de un producto de NorthVerity.

Un porcentaje de área de HPLC no es automáticamente una fracción másica. El contenido neto de péptido y la pureza cromatográfica describen aspectos distintos de un material, y su uso en el cálculo de la concentración del péptido objetivo depende del método analítico y de la base de expresión. Esta herramienta no multiplica por un porcentaje de HPLC ni deduce la pureza del péptido objetivo.

Pureza del péptido frente a contenido neto de péptido

Diluir una solución madre conocida: C₁V₁ = C₂V₂

En una dilución en la que se conserva la cantidad de soluto, C₁V₁ = C₂V₂. C₁ es la concentración de la solución madre, V₁ el volumen de solución madre transferido, C₂ la concentración objetivo y V₂ el volumen final de la solución. Despejando la transferencia se obtiene V₁ = C₂V₂ ÷ C₁.

Suponga que necesita 10 mL a 100 µM a partir de una solución madre de 10 mM. Exprese primero ambas concentraciones en las mismas unidades: 10 mM son 10 000 µM. El volumen de transferencia es 100 × 10 ÷ 10 000 = 0,1 mL, es decir, 100 µL. Transfiera ese volumen y lleve la solución a un volumen final total de 10 mL.

Si los volúmenes se consideran aditivos, el diluyente estimado es de 9,9 mL. La calculadora muestra la transferencia y el volumen final necesario porque el volumen final es la magnitud que manda. La ecuación no determina un disolvente compatible ni establece que el péptido siga disuelto.

Usar la calculadora de dilución simple

Comprobaciones antes de fiarse del número

Use el volumen final de la solución en lugar de suponer que el disolvente añadido equivale al volumen de la solución terminada. Mantenga visibles las conversiones de unidades en el registro. Confundir mg con µg, o mM con µM, cambia el resultado en un factor de mil.

Una concentración objetivo mayor que la de la solución madre no se puede obtener solo diluyendo. Si ambas concentraciones son iguales, no hace falta diluir. Si la transferencia calculada queda por debajo del rango de trabajo validado de su equipo, el número mostrado no es una instrucción práctica de pipeteo; planifique una dilución intermedia adecuada según su método de laboratorio.

El cálculo supone que el material que representa la masa introducida está presente en la solución en la base indicada. La disolución incompleta, la adsorción, la precipitación, la degradación y las pérdidas en la transferencia son cuestiones experimentales aparte. Una concentración calculada no es una medición analítica de la solución final.

Registre el identificador del material, el lote, la forma química, la base de masa, la fuente de la masa molar, el volumen final, los cálculos y la fecha de preparación. En cuestiones de compra, pida los documentos del lote ofrecido y resuelva la información que falte antes de tratar un valor nominal como verificado.

Certificado de análisis (COA): cómo leer el COA de un péptido

Almacenamiento: perfiles y documentos del lote

Preguntas frecuentes

¿Puedo convertir mg/mL en µM sin el peso molecular? No. La concentración molar cuenta la cantidad en moles, así que se necesita la masa molar correspondiente. Una concentración másica sí puede expresarse sin ella.

¿1 mg/mL es igual a 1 µg/µL? Sí. Tanto el numerador como el denominador cambian en un factor de 1000, y la concentración másica es la misma.

¿Esta calculadora elige un disolvente o una condición de almacenamiento? No. Use la documentación específica del material y un método de laboratorio adecuado. El cálculo aporta cantidades, no pruebas de solubilidad, estabilidad o idoneidad biológica.

Dilución seriada: fórmula, tabla y ejemplos resueltos

Una dilución seriada usa la solución de una dilución para preparar la siguiente. En esta hoja, todos los pasos usan el mismo factor de dilución y el mismo volumen preparado. La solución madre original es el punto de partida, no el tubo 1. Por eso la primera concentración diluida es C₀/D y la concentración en el paso n es C₀/Dⁿ.

Aquí D es un factor de reducción mayor que 1. Una dilución 1:10 significa una parte de la solución anterior en diez partes totales: una parte de muestra más nueve de diluyente cuando los volúmenes son aditivos. No significa una parte de muestra más diez de diluyente. Otras referencias llaman dilución a la fracción restante, 1/D; anote la convención junto con sus números.

Si V es el volumen preparado en cada tubo, el volumen de transferencia es V/D y el diluyente estimado es V − V/D. Introduzca la concentración inicial en M, mM, µM o nM; la tabla mantiene esa unidad de concentración en todo momento. Todos los volúmenes exportados se expresan en µL, aunque la entrada use mL o L.

La tercera calculadora aplica estas ecuaciones de 1 a 48 pasos. Los volúmenes describen un modelo de planificación con volúmenes aditivos, mezcla homogénea y sin pérdida de soluto en la transferencia. Un método distinto, factores variables por paso o tomas de muestra adicionales requieren un plan aparte.

Usar la calculadora de dilución seriada

Cuatro pasos 1:10 a partir de una solución madre de 1000 µM

Elija una solución inicial de 1000 µM, un factor de 10, cuatro pasos de dilución y un volumen preparado de 1000 µL por tubo. Cada paso recibe 100 µL de su origen indicado y unos 900 µL de un diluyente compatible. Las concentraciones sucesivas son 100, 10, 1 y 0,1 µM.

Solo los primeros 100 µL proceden de la solución madre original. La segunda transferencia sale del tubo 1, la tercera del tubo 2 y la cuarta del tubo 3. El diluyente total estimado es 4 × 900 = 3600 µL. Estas cantidades no incluyen material adicional para volumen muerto, pérdidas o repeticiones.

Tras la transferencia siguiente, los tubos 1 a 3 conservan 900 µL cada uno. El tubo 4 conserva 1000 µL porque el plan no prevé transferir desde el último tubo. Retirar una alícuota representativa de un tubo bien mezclado reduce su volumen pero no cambia su concentración. Si necesita al menos 1000 µL en cada tubo, un volumen preparado de 1000 µL no basta para los primeros tubos.

Serie 1:2 y planificación del volumen restante

Con una solución inicial de 20 µM, un factor de 2 y 200 µL preparados por tubo, cada paso combina 100 µL de la solución anterior con unos 100 µL de diluyente. Cuatro pasos dan 10, 5, 2,5 y 1,25 µM. Los tres primeros tubos conservan 100 µL tras la transferencia siguiente; el último conserva 200 µL.

En este modelo de volumen constante, lo que queda en un tubo anterior es R = V × (1 − 1/D). Para conservar al menos R en esos tubos, use V = R × D/(D − 1) y compruebe después la capacidad del recipiente y el rango de transferencia. Por ejemplo, para conservar 200 µL en cada tubo anterior de una serie 1:2 se necesitan 400 µL preparados por tubo y una transferencia de 200 µL. El último tubo contendría 400 µL salvo que su método prevea una extracción.

Una serie 1:2 y una serie 1:10 cubren espaciados de concentración distintos. Elija el factor según el método experimental y el rango necesario. La calculadora no elige una concentración de ensayo, una exposición biológica ni una dosis de tratamiento.

Copie la tabla de dilución y revise la hoja

«Copiar tabla» genera una hoja separada por tabulaciones para una hoja de cálculo. «Descargar CSV» incluye la concentración inicial, el factor por paso, el tubo de origen, el volumen preparado, la transferencia, el diluyente estimado y el volumen restante tras la transferencia. Si no hay acceso al portapapeles, la herramienta muestra un texto seleccionable como alternativa. Al cambiar los datos se borra el resultado anterior, de modo que una tabla exportada corresponde al cálculo mostrado.

Revise la concentración más baja, el tamaño de la transferencia, la solución madre disponible y el líquido que queda en cada tubo. Una transferencia calculada inferior a 1 µL se señala para revisarla frente al rango validado del equipo; un número mayor no es automáticamente adecuado para cualquier pipeta. Mezcle según el método de laboratorio antes de tomar la siguiente alícuota y considere por separado las pérdidas de transferencia.

El CSV es un registro de cálculo, no una medición ni un protocolo de laboratorio completo. Conserve en el registro asociado la identidad del material, el lote, el disolvente, la fecha de preparación y cualquier ajuste experimental. La solubilidad, la adsorción, la estabilidad y el rendimiento del instrumento no se deducen del factor de dilución.

Relacione el cálculo con la documentación del material

En la compra de péptidos, establezca primero qué representa la concentración de partida: la forma química indicada, la base de masa y la masa molar correspondiente. La calculadora de peso molecular ayuda con una secuencia admitida, y la guía de pureza y contenido neto explica por qué un porcentaje de área de HPLC no es automáticamente una corrección de la masa pesada.

Revise la información disponible del material y pida la documentación del lote ofrecido al solicitar una cotización por escrito. Incluya el identificador del material y la información que falta por resolver. El cálculo en sí no verifica el material suministrado, la disponibilidad actual ni el lote ofrecido.

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